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体育彩票6%2b1:次氯酸钠和三氯化铝对黄瓜种子灭菌效果的影响

发布日期:2016年11月17日 点击:820

快甘肃快三走势图今天 www.cczyw.tw 植物组织培养的材料,通常都以升汞或次氯酸钠进行灭菌。前者灭菌效果好,但较难彻底清除残留的汞;后者较易清除残留物,但灭菌效果不如前者。二者在常规灭菌剂量范围内均对植物材料产生多种生理影响。如汞会抑制lAA对细胞壁的影响和幼苗生长;次氯酸钠会影响植物对GA的反应和蛐苗生长,还可能促进体细胞胚胎发生。因此,选择消毒剂时,除了考虑灭菌效果和清除残留物的难易程度外,还应适当注意消毒剂的生理影响。文献中对升汞和次氯酸钠的生理影响的比较报道较少。本文对此进行了研究。

材料与方法

黄瓜品种杭青2号的成熟种子经水漂洗后,分别用1.04%次氯酸钠处理15min或0,l%升汞处理8min进行表面灭菌之,以无菌水洗涤5次,吸干表面,接种于无激素的MS固体培养基上,于25士10下萌发和育苗,每天光照14h(光照度2000lx)。每处理接种10管,每管4粒种子。以不进行消毒剂灭菌处理的种子为对照。每天记录萌发种子数。发芽系数按公示计算。苗高、根长和苗鲜重按常规方法测定。测定干重时,村料于120℃下烘15min后,再在80℃下烘至恒重。每苗两片子叶间鲜重差异的百分率按两片子叶鲜重差/两片子叶鲜重之和/2×lOO%计算。每苗两片子叶间叶色差异的百舟率按两子叶间叶色有明显差异的子叶对数/子叶总对数×100%计算;测定子叶开度时,取20株幼苗,用量角器量取每对子叶的开角+取平均值。子叶可溶性蛋白质含量用Folin-酚试剂法测定。子叶叶绿素含量参照扬善元和叶济宇的丙酮浸提法测定,实验结果的统计分析参照张全德和胡秉民方法采用BASIC程序方差分析。检验子叶离体培养反应性时,剥去种皮,切去胚轴.取子叶灭菌后接种于含2mg/LKT和3%蔗糖的MS固体培养基上,每一种子的阿片子叶接种于同一培养管中,培养条件同种子萌发。所有实验均重复两次。

结果与讨论

1、消毒剂对种子萌发和幼苗生长的影响

从表1可见,升汞处理的.其第ld的种子萌发率略低于对照;而次氯酸钠处理的则显著低于对照和升汞处理的。连续4d的发芽系数仍然是次氯酸钠灭菌的较低,但对照的反不如升汞灭菌的。由于本实验是在无激素的MS固体培养基上进行,未经消毒剂灭菌的黄瓜种子在萌发2d后肉眼可见明显的微生物污染现象,因此,可以认为不用消毒剂的对照在第2d萌发率显著下降,以及发芽系数低于升汞处理系微生物污染所致;一般认为,种子发芽过程中的早期发芽量与其活力有关、而在通常用于种子灭菌的剂量范围内,次氯酸钠和升汞对种子灭菌育可能在不同程度上降低种子活力。方差分析表明,二者的差异是显著的,次氯酸钠对种子活力的影响显著大干升汞。由于不经灭菌难以避免污染,故以下试验均限于次氯酸钠和升汞处理间的比较。

用次氯酸钠和用升汞进行种子灭菌所长成的黄瓜幼苗生长状况也明显不同。表2结果表明,二者的苗高、苗鲜重和苗干重的差异均达显著程度,次氯酸钠灭菌的种子所长成的苗生长显著较好。二音的子叶鲜重和子叶干重也是次氯酸钠灭菌的明显高于升汞灭菌的。但次氯酸钠灭菌的幼苗的子叶鲜重差异却小于升汞灭菌的。

2消毒剂对幼苗子叶某些性状的影响

从表3可以看出,除了叶绿索含量外.次氯酸钠和升汞灭菌的黄瓜幼苗子叶之间的可溶性蛋白质含量和子叶开度也有差异,但不显著,前者略高于后者:

3消毒剂对子叶培养反应的影响

直接从种子切取子叶身灭菌后进行培养的结果表明,消毒剂显著地影响白色子叶培养后的转绿长大过程,用次氯酸钠灭菌的子叶大小、转绿速度和成活率都明显大于升汞灭菌,但子叶颜色反不及后者深绿(表3),因此,消毒剂的影响是多方面的。从提高离体子叶培养反应性角度考虑,用次氯酸钠灭菌比用升汞灭菌好。但两者每苗成对的两片子叶的叶色转绿进程并不一定同步,在培养的一定阶段内两片子叶间叶色育明显差异。次氯酸钠灭菌的子叶转绿快,其两片子叶的转绿进程的同步程度低(表3),因而在较长时间内有较多的种子所出现的两片子叶叶色差异明显。结合成活率,把由于灭菌所导致的始终处于僵化状态的子叶排除在外.离体子叶培养一定时间后,两种消毒剂灭菌都能使每苗成对的两片子叶叶色差异率达100%。方差分析的结果表明,两种消毒剂之间的差异也达显著程度。因此,次氯酸钠和升汞对黄瓜种子两片子叶转绿的同步程度有着不同的影响是可以肯定的,为了排除消毒剂处理引起的可能性,我们进行了从黄瓜种子切取子叶不经过消毒剞处理直接培养于垫育四层滤纸保湿的培养皿中的试验,结果表明,种子中两片子叶在离体保温培养初期同样存在叶色转绿不同步现象,在离体培养第2d,两片子叶间叶色差异率达8l%(另文发表),因此,这一现象并非由消毒剂处理所引起的。

综上所述,次氯酸钠和升汞进行黄瓜种子灭菌,对种子萌发和幼苗性状,以及子叶培养时的表现具有明显不同的影响。因此,在进行种子灭菌时应注意消毒剂种类的选择,在分析解释实验结果时要注意到消毒剂可能存在的后效应。关于黄瓜种子中两片子叶在离体培养时存在的叶色转绿不同步现象未见有其它同类报道,其生理意义有待探讨。

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